細胞染色液在檢驗方面有哪些*的原理及方法
更新時間:2019-04-02 點擊次數:3067次
細胞染色液是一種適用于活細胞細胞核染色的溶液。僅需染色10分鐘就能用熒光顯微鏡觀察到非常明亮的細胞核藍色熒光染色。
細胞染色液是采用世界衛生組織推薦的染色方法而配制,它跟瑞氏染色一樣,都是利用Romanowsky Stain技術原理改良而成的,所得到的結果也跟瑞氏染色液相類似。但迪夫快速細胞染色所花費的時間較短,約1分鐘30秒即可完成染色步驟。較適合于批量浸染,更加節省染色時間,且具背景清晰無沉渣等特點。
本染色液系利用Romanowsky Stain技術原理改良而成,染色液中含有酸性染料和堿性染料利用各待染物質對染料的親和力不同,呈現不同的著色而達到辨別其形態、特征的目的。
細胞染色液檢驗方法:
一、滴染法:
1、將1包磷酸鹽緩沖液粉劑溶于1L蒸餾水后,裝于兩個500ML沖洗瓶中備用。
2、加迪夫A溶液覆蓋整個涂片染色(20-30)秒。
3、用磷酸鹽緩沖液沖洗,洗掉迪夫A溶液,然后稍甩干緩沖液。
4、再滴加迪夫B溶液 覆蓋于整個涂片染色(20-30)秒。
5、水洗、干燥、鏡檢。
二、浸染法:
1、將1包磷酸鹽緩沖液粉劑溶于1L蒸餾水后,裝于兩個500ML沖洗瓶中備用。
2、分別把迪夫A溶液、 迪夫B溶液、磷酸鹽緩沖液適量倒于帶蓋的染缸中。
3、把涂片浸泡于迪夫A溶液(20-30)秒。
4、于磷酸鹽緩沖液的染缸中洗掉迪夫A溶液 ,稍甩干緩沖液。
5、再把涂片浸泡于迪夫B溶液(20-30)秒。
6、水洗、干燥、鏡檢。
細胞染色液樣本要求:
1、血細胞涂片染色:要求新鮮全血或EDTA·K2抗凝血。
2、陰道分泌物涂片染色:新鮮標本離開人體涂片后,需盡快以火焰或酒精固定,以避免細胞變形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,應在空氣中快速搖動或扇干,防止細胞皺縮變形或因空氣潮濕而溶血,不能用高溫或火烤。
4、脫落細胞涂片染色:采取檢體并涂片,待檢涂片固定可采用自然干燥法或濕片固定液固定法。一般情況下若采用濕片固定法,標本浸泡時間稍長些,效果會更佳。若采用濕片固定液固定標本,固定液用后需經常過濾,更換,防止細胞交叉污染。
細胞染色液注意事項:
1、 固定液采用Carnoy固定液。
2、 甲苯胺藍染色后不宜采用低濃度乙醇脫水,否則容易導致褪色。
3、 分色后應快速入95%乙醇、無水乙醇、二甲苯的時間不宜過久,否則容易導致褪色。
4、 針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染于甲苯胺藍染色液的時間應相應延長。